RESUMO A antracnose é a principal doença pós-colheita do abacate. O presente trabalho teve como objetivos caracterizar a agressividade e a atividade enzimática de 30 isolados de Colletotrichum spp. de abacate. Abacates ‘Fuerte’ foram inoculados com disco de BDA contendo estruturas de cada isolado e após sete dias mensuraram-se os diâmetros das lesões. Dois grupos de isolados foram distinguidos quanto à agressividade pelo teste de teste de Scott-Knott (p=0,05), um com lesões entre 34,0 e 38,2 mm e outro com lesões entre 38,7 e 44,0 mm de diâmetro. Para caracterização enzimática, avaliaram-se as áreas dos halos formados em substratos específicos para detecção de amilase, celulase, lacase, lipase, pectato liase e protease e a atividade da enzima catalase. Os isolados não produziram amilase suficiente para formação de halo em meio de cultura. Todos os isolados produziram catalase, pectato liase e protease, enquanto 46% produziram lacase e 97% tiveram as atividades da celulase e lipase detectadas. Distinguiram-se dois grupos de isolados para as enzimas catalase e pectato liase, cinco grupos para a celulase, seis grupos para a lacase e sete grupos para as enzimas lipase e protease, pelo teste de teste de Scott-Knott (p=0,05). Não houve relação entre as atividades enzimáticas e a agressividade dos isolados.

ABSTRACT Anthracnose is the main post-harvest disease affecting avocado. This study aimed to characterize the aggressiveness and the enzyme activity of 30 isolates of Colletotrichum spp. from avocado. Avocados ‘Fuerte’ were inoculated with PDA disc containing structures from each isolate and after seven days the diameter of lesions was measured. Two groups of isolates were distinguished according to their aggressiveness based on Scott-Knott test (p=0.05), the first one showed lesions between 34.0 and 38.2 mm and the second one showed lesions between 38.7 and 44.0 mm in diameter. Enzymatic characterization consisted in evaluating the areas of halos formed on specific substrates for detection of amylase, cellulase, laccase, lipase, pectate lyase and protease, as well as catalase enzyme activity. Isolates did not produce amylase sufficient for halo formation on culture medium. All isolates produced catalase, pectate lyase and protease, while 46% produced laccase and 97% had cellulase and lipase activity detected. Two groups of isolates were distinguished for the enzymes catalase and pectate lyase, five groups for cellulase, six groups for laccase, and seven groups for the enzymes lipase and protease, according to Scott-Knott test (p=0.05). There was no relationship between enzyme activities and aggressiveness of the isolates.

RESUMO: Frutos de maracujá (Passiflora edulis ) foram encontrados com sintomas de podridão no campo, na cidade de Tanhaçu, Bahia. Após isolamento do patógeno associado a essas podridões, o presente trabalho teve como objetivo realizar a caracterização de um isolado de Ceratocystis de maracujá para melhor compreender esse patossistema. A caracterização molecular foi realizada com base no sequenciamento da região ITS-5.8S rDNA. Realizou-se a caracterização patogênica em mudas e frutos de maracujá. A colonização dos frutos de maracujá foi acompanhada com técnicas de microscopia de varredura (MEV). A análise do DNA do isolado de Ceratocystis mostrou que este pertence à espécie Ceratocystis fimbriata . As mudas de maracujá inoculadas apresentaram lesão 30 dias após a inoculação, e não foram observadas murcha nem morte das plantas inoculadas. Nos frutos não foram constatadas diferenças nas lesões causadas por esse fungo entre os cultivares, com médias de lesões de 1,0 a 2,2 cm de diâmetro, aos 7 e 11 dias, respectivamente. Nas análises realizadas em MEV, foram observadas a germinação dos esporos e a penetração do fungo nos frutos no período entre 2 e 6 horas após a inoculação. Doze e 24 horas após a inoculação foi visualizada a colonização do fruto, tanto externa como internamente, e 48 horas após a inoculação se notou o início da degradação da parede externa da casca do fruto. Noventa horas após a inoculação, observou-se a formação de novos peritécios, tanto na parte interna como na parte externa do fruto. Este estudo vem complementar as informações relacionadas à interação desse fungo com frutos de maracujazeiro.

ABSTRACT: Passion fruits (Passiflora edulis ) were found with symptoms of rot in the field, in the city of Tanhaçu, Bahia. After isolating the pathogen associated with this rot, in the present study we aimed to characterize the Ceratocystis isolate from passion fruit for better understanding this pathosystem. Molecular characterization was done based on the region ITS-5.8S rDNA. Pathogenic characterization was carried out for seedlings and fruits of passionflower. Passion fruit colonization was monitored by means of scanning electron microscopy techniques (SEM). DNA analysis of the Ceratocystis isolate from passionflower pointed out that this species belongs to Ceratocystis fimbriata . The inoculated passionflower seedlings showed injury at 30 days post-inoculation, but no inoculated plant showed wilt or died. Considering fruits, no differences were found for lesions caused by this fungus among cultivars, and lesions had average diameters of 1.0 and 2.2 cm at 7 and 11 days, respectively. The analysis using SEM indicated fungus spore germination and penetration in the fruit between 2 and 6 hours post-inoculation. At 12 and 24 hours post-inoculation, fruit colonization was noted both externally and internally, while fruit wall degradation started at 48 hours post-inoculation. At 90 hours post-inoculation, formation of new perithecia was observed inside and outside the fruit. This study complements the available information about the interaction of this fungus with passion fruit.

RESUMOO Estado de São Paulo é um dos maiores produtores de frutas no Brasil. A competitividade no comércio internacional de frutas demanda a minimização de danos pós-colheita, especialmente os causados pela antracnose. Para o controle eficaz da antracnose em uma região é necessário conhecer quais espécies estão associadas a cada hospedeiro e qual a variabilidade dos agentes causais. Este trabalho objetivou caracterizar e identificar isolados de Colletotrichum de frutíferas cultivadas no Estado de São Paulo, Brasil. Foram analisados 93 isolados obtidos de abacate, manga, maracujá e pêssego, por meio de morfometria de conídios e colônias e análise molecular (amplificação por PCR com oligonucleotídeos espécie-específicos e análise de sequências de nucleotídeos das regiões ITS e β-tubulina). Alta variabilidade morfométrica foi observada entre os isolados. A análise molecular indicou que, no Estado de São Paulo, as antracnoses do abacate, manga, maracujá e pêssego podem ser causadas por diferentes espécies do complexo C. gloeosporoides, revelando também a presença de C. boninense associada à antracnose do maracujá e de espécies não identificadas dos complexos C. acutatum e C. gloeosporioides causando antracnose em pêssego.

ABSTRACTThe state of São Paulo is one of the largest fruit producers in Brazil. Competitiveness in the international trade in fruits has demanded the minimization of postharvest damage, especially that caused by anthracnose. For the effective control of anthracnose in a certain region, it is necessary to know which species are associated with each host and the variability of the causal agents. This study aimed to characterize and identify Colletotrichum isolates from fruit trees grown in the state of São Paulo, Brazil. A total of 93 isolates obtained from avocado, mango, passion fruit and peach were analyzed according to conidium and colony morphology and molecular analysis (PCR amplification with species-specific primers and analysis of nucleotide sequences of the ITS regions and β-tubulin). There was high morphometric variability among isolates. Molecular analysis indicated that, in the state of São Paulo, anthracnose of avocado, mango, passion fruit and peach can be caused by different species of the C. gloeosporoides complex, also revealing the presence of C. boninense associated with passion fruit anthracnose and unidentified species of C. acutatum and C. gloeosporioides complexes causing anthracnose in peach.

A espécie pinhão manso (Jatropha curcas L.), vem se destacando como a principal matéria-prima para produção de biodiesel. O objetivo deste estudo foi caracterizar dois isolados de Colletotrichum spp., obtidos de sementes dessa espécie, através de análise morfológica, cultural e molecular, além de avaliar a patogenicidade desses isolados em folhas e frutos da planta. Para análise morfológica foram medidos o comprimento e a largura de 30 esporos de cada isolado, produzidos em meio de cultura Extrato de Malte-Agar, a 25±1 ºC, sob luz contínua. A análise cultural foi realizada pelo crescimento do fungo em meio de BDA, com avaliações diárias do crescimento do micélio e pela coloração da colônia, após sete dias de incubação. O DNA dos isolados foi extraído e oligonucleotídeos específicos (região ITS4) foram identificados pela técnica de PCR e utilizados para identificar C. capsici (CcInt) e C. gloeosporioides (CgInt). A patogenicidade dos isolados foi avaliada em plantas com diferentes idades (10, 20, 30, 40, 50 e 60 dias após semeadura) e em frutos em seis estádios de maturação. Com base nestas análises os isolados foram identificados como C. capsici e C. gloeosporioides. Plantas jovens e frutos desenvolvidos foram mais suscetíveis à infecção pelas duas espécies do fungo.

The species known as physic nut (Jatropha curcas L.) has become important as one of main sources of feedstock for biodiesel production. The aims of this study were characterizing two different isolates of Colletotrichum spp. obtained from seeds of this species, through morphological, cultural, and molecular analyses; as well as assessing pathogenicity of both isolates on leaves and fruit of this plant species. For morphological analysis, length and width of 30 spores of each isolate, produced on medium Malt Extract-Agar (MEA), at 25 ± 1 ºC, and under constant light, were measured. Cultural analysis was performed by the fungus growth on PDA medium, through daily measurements of the mycelial growth, and the color of colonies after seven days incubation. DNA of the isolates was extracted and specific oligonucleotides primers (region ITS4) were identified by PCR and used to identify C. capsici (CcInt) and C. gloeosporioides (CgInt). Pathogenicity of isolates was assessed on plants aged 10, 20, 30, 40, 50, and 60 days after sowing and fruits at six maturation stages. Based on these analyses, isolates were identified as C. gloeosporioides and C. capsici. Young plants and the older fruits were more susceptible to infection by the two fungus species.